Верификација аналитичких карактеристика HPLC/EC методе за одређивање катехоламина у урину

Abstract

Увод: Одређивање катехоламина и њихових метаболита од великог је значаја у дијагнози и лечењу неоплазми симпатоадреналног система као што су феохромоцитом и неуробластом. Медицинско-биохемијске лабораторије верификују перформансе метода које је декларисао произвођач, с циљем њиховог репродуковања у условима рутинског рада Циљ рада: Основи циљ нашег истраживања било је испитивање аналитичких карактеристика Recipe HPLC/EC методе за одређивање катехоламина у урину. Материјал и методе: Анализирана је комерцијална Recipe HPLC/EC метода на Waters е2695 Separation Module анализатору са електрохемијским детектором Waters е2465, произвођача Alliance. Спроведена је верификација непрецизности и линеарности наведене методе, за два нивоа концентрација комерцијалног контролног узорка за норадреналин, адреналин и допамин Резултати: Добијени су следећи резултати параметара непрецизности: непрецизност унутар серије, између серија, из дана у дан, унутар лабораторије износила је редом за норадреналин, адреналин и допамин 1,40-1,56%, 3,51-4,27% и 1,0-1,13%;1,01-2,28%, 3,32-4,03% и 1,03-2,70%; 1,47-1,94%, 2,81-3,24% и 1,16-1,49%;1,62-4,01%, 5,08-6,40% и 1,94-3,94%. Потврђен је линеаран однос висине пика и концентрације за норадреналин у опсегу 44,5-96,0 (μg/L), адреналин 9,3-30 (μg/L) и допамин 62-248 (μg/L). Закључак: Метода је испунила неопходне захтеве за рутинску примену у условима наше лабораторије, а концентрације аналита одређене овом методом могу се користити за дефинисану клиничку примену ових параметара у дијагностичке сврхе.

Introduction: Measurement of catecholamines and their metabolites has great importance in diagnosis and treatment of sympathoadrenal system neoplasms such as pheochromocytoma and neuroblastoma. Medical biochemistry laboratories verify manufacturer’s claims, in order to reproduce it in routine laboratory conditions. The Aim: The main aim of our study was to asses the analytical characteristics of the Recipe HPLC/EC assay for the measurement of catecholamines in urine. Material and Methods: The commercial Recipe HPLC/EC assay was analyzed on the Waters e2695 Separation Module analyzer with the electrochemical detector Waters e2465, manufactured by Alliance. Method imprecission and linearity verification was conducted for two levels commercial control samples, for noradrenaline, adrenaline and dopamine Results: In this study the following imprecision parameters were obtained: within-run, between runs, day-to-day, within laboratory imprecision was, respectively for noradrenaline, adrenaline and dopamine 1,40-1,56%, 3,51-4,27% and 1,0-1,13%; 1,01-2,28%, 3,32-4,03% and 1,03-2,70%; 1,47-1,94%, 2,81%-3,24% and 1,16-1,49%; 1,62-4,01%, 5,08-6,40% and 1,94-3,94%. A linear relationship of peak height and concentration was confirmed for noradrenaline in the range of 44,5-96,0 (μg/L), adrenaline 9,3-30 (μg/L), and dopamine 62-248 (μg/L). Conclusion: Based on the obtained results, we conclude that the assay fulfilled the necessary requirements for aplication in routine work contitions of our laboratory and that the concentrations of the measured analytes can be used for their defined clinical application in diagnosis.